胰蛋白酶-EDTA 溶液(0.05%:0.02%,含酚紅)

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

胰蛋白酶(Trypsin)是由胰臟產(chǎn)生沒(méi)有活性的胰蛋白酶原分泌到小腸后，小腸內的腸肽 酶會(huì )活化該酶原，形成胰蛋白酶。胰蛋白酶的特點(diǎn)在于已經(jīng)活化的胰蛋白酶，能夠繼續活化更多胰蛋白酶原，這種過(guò)程即自動(dòng)催化。胰蛋白酶在小腸工作，它會(huì )將蛋白質(zhì)水解為肽，進(jìn)而分解為氨基酸，其適溫度約為 37℃。Ø Trypsin-EDTA solution(0.05%:0.02%,含酚紅)由 0.05%胰酶、0.02%EDTA、少量酚紅等組成，經(jīng)過(guò)濾除菌。本試劑可以直接用于培養細胞的消化，或者一些組織的消化，通常室溫下 1～2min 左右就可以消化下大多數貼壁細胞。

產(chǎn)品組成：Trypsin-EDTA solution(0.05%:0.02%,含酚紅) 100ml -20℃

自備材料：

1、 PBS、Hanks液或無(wú)血清培養液

2、 顯微鏡

3、 離心機

操作步驟(僅供參考)：

1、貼壁細胞的消化

①吸除培養液，用無(wú)菌 PBS、Hanks 液或無(wú)血清培養液洗滌細胞一次，以去除殘余的血清。

②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution，略蓋過(guò)細胞即可，室溫放置 0.5～2min， 不同的細胞消化時(shí)間有所不同。

③顯微鏡下觀(guān)察，細胞明顯收縮，并且肉眼觀(guān)察培養器皿底部發(fā)現細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變

化；或者用槍吹打細胞發(fā)現細胞剛好可以被吹打下來(lái)，吸除胰酶細胞消化液。加入含血清的  *細胞培養液，吹打下細胞，即可直接用于后續實(shí)驗。

④如果發(fā)現消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。

⑤如果發(fā)現細胞消化時(shí)間過(guò)長(cháng)，未及吹打細胞，細胞已經(jīng)有部分直接從培養器皿底部脫落， 直接用胰酶細胞培養液把細胞全部吹打下來(lái)。1000～2000g 離心 1min，沉淀細胞，盡量

去除胰酶細胞消化液后，加入含血清的*培養液重新懸浮細胞，即可用于后續實(shí)驗。

2、組織的消化

不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。

注意事項：

1、 盡量減少反復凍融的次數，以免失效。

2、在使用 Trypsin-EDTA solution 過(guò)程中，要特別注意避免消化液被細菌污染。

3、Trypsin-EDTA solution 消化細胞時(shí)間不宜過(guò)長(cháng)，否則細胞鋪板后生長(cháng)狀況會(huì )較差。

4、為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗服并戴一次性手套操作。

有效期： 12 個(gè)月有效。

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