縮小ELISA檢測誤差

   在自然因素（試劑穩定性、準確率、儀器精密度）和人為因素（操作者）并存的情況下，要準確報告實(shí)驗結果，尚為一個(gè)值得探討的話(huà)題?，F從以下方面加以討論。

 （1）檢驗技師應具備從事實(shí)驗室操作的基本素質(zhì)和實(shí)踐經(jīng)驗。能熟練操作實(shí)驗儀器、器械，具有一定總結和分析問(wèn)題的能力，對實(shí)驗中出現的意外情況能及時(shí)妥善解決。

 （2）使用校對過(guò)的微量移液器，排除自然誤差。移液器準確與否對定量檢測尤為重要。

  (3) 評估試劑的實(shí)用性。試劑的穩定與否，對準確率的高低到頭重要。在試劑啟用前，應進(jìn)行陰、陽(yáng)對照及樣品反復比照試驗，判定試劑符合要求后方可使用。

 （4）操作前仔細閱讀說(shuō)明書(shū)。嚴格按照說(shuō)明書(shū)要求進(jìn)行規范化操作。不同批號的試劑不可混用。值得改進(jìn)的地方，反復試驗確定成立后才能改進(jìn)，比如洗板次數的掌握等。

   (5) 加樣要準確、快速?；瘜W(xué)理論表明，生成物的量與反應物的量成正相關(guān)。加樣不準確，酶生成物的量不能確定，直接影響顯色結果。另外，顯色的深淺及A值的測定與加入顯色劑和終止液的量有關(guān)，所以加樣應慎重。要求在一定時(shí)間內加樣完畢的實(shí)驗，如果加樣遲緩，便出現誤差，而且試劑長(cháng)時(shí)間暴露在外，尤其室溫過(guò)高時(shí)，保存期會(huì )縮短甚至失效。

  （6）洗滌*。洗板不*，酶結合物本底顯色會(huì )呈現假陽(yáng)性。另外，洗滌液要新鮮，現用現配，陳舊的洗滌液會(huì )出現本底增高現象，也可能出現假陽(yáng)性。

  （7）嚴控反應時(shí)間。反應時(shí)間過(guò)長(cháng)，酶失活；反應時(shí)間過(guò)短，酶結合物不能與血清中的微生物抗原抗體充分結合，生成物結構松散不牢固，容易洗掉，都可能造成假陰性。

  （8）嚴格掌握顯色時(shí)間。顯色時(shí)間過(guò)短，加入終止液反應終止后，底物結合物的量過(guò)少，易出現假陰性。超過(guò)顯色要求時(shí)間后顯色，應判為假陽(yáng)性，這可能與試劑本身有關(guān)。加顯色劑后立即顯色，不可報陽(yáng)性，這可能是本底顯色的結果。

  （9）注意試劑保存期，過(guò)保存期的試劑不能使用。

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