ELISA放大系統

   一,生物-親和素系統（Biotin-Avidin System,簡(jiǎn)稱(chēng)BAS）

   生物素與抗生物素之間具有*的親和力,可以縮短反應時(shí)間,達到快速檢測的目的.另外,抗體和酶的生物素標記率高,又不影響其活性,每個(gè)親和素分子能結合4個(gè)生物素,每個(gè)生物素能標記大量酶分子,使得ELISA的敏感性大大提高,生物素與親和素的結合也極為穩定,不會(huì )在洗滌過(guò)程中脫落.BA-ELISA是在常規ELISA的基礎上,結全生物素（Biotin）與親和素（Avidin）的高度放大作用,形成的一種檢測方法.BA-ELISA分為:

1,LAB法即酶聯(lián)親和素-生物素標記法（Labeled avidin-biotin,簡(jiǎn)稱(chēng)LAB）.用辣根過(guò)氧化物酶直接標記親和素,用生物素標記第二抗體.

2,ABC法即酶聯(lián)親和素-生物素-過(guò)氧化物酶復合物法（Avidin-Biotin-Peroxidase Complex,簡(jiǎn)稱(chēng)ABC）.如用鏈霉親和素（Streptavidin）,則形成鏈霉親和素-酶聯(lián)生物素復合物（Streptavidin-Biotin-Peroxidaes Complex,簡(jiǎn)稱(chēng)SABC）.在ABC法中,用生物素標記第二抗體,又用生物素標記過(guò)氧化物酶.在使用前30min,親和素與酶聯(lián)生物素以1:1的比例混勻.1個(gè)親和素分子結合3個(gè)生物素分子,親和素剩下的1個(gè)結合點(diǎn)與標記第二抗體的生物素結合,親和素起橋聯(lián)作用.ABC法比PAP（Peroxidase-antiperoxidase tech-nique）法敏感幾十倍.

3,BAB法即酶聯(lián)親和素-生物素橋法（Bridged avidin-biotin,簡(jiǎn)稱(chēng)BAB）.用游離親和素（或鏈霉親和素）作為橋聯(lián)劑,將生物素標記后開(kāi)成的復合物與酶標記生物素連結起來(lái),然后進(jìn)行樣品的檢測.由于標記抗體分子上連有多個(gè)生物素,因此,zui終形成的抗原-生物素標記抗體-親和素-酶標生物素復合物可積聚大量的酶分子;加入相應底物后,產(chǎn)生強烈的酶促反應,大幅度提高檢測的靈敏度.