酶活性檢測實(shí)驗測定法是利用酶能專(zhuān)一而高效地催化化學(xué)反應的性質(zhì)，通過(guò)測定酶促反應速度來(lái)檢知體液等生物樣品中某種酶的含量和活性的分析技術(shù)。
 

　　一、酶活性檢測實(shí)驗的測定方式：
 

　　酶促反應速度的測定可采用兩種方式:
 

　　一、測定完成一定量反應所需的時(shí)間;二、測定單位時(shí)間內的酶促反應量。前者稱(chēng)為終點(diǎn)法，后者稱(chēng)為動(dòng)力學(xué)法。
 

　　1.終點(diǎn)法
 

　　該方式是在特定條件下，將樣品中要檢知的酶作用一定量的底物，然后根據反應進(jìn)行到某一程度(即達到某一指標)所需要的時(shí)間長(cháng)短來(lái)估計酶的活力。
 

　　其一個(gè)發(fā)展是采用檢測器對反應進(jìn)行連續跟蹤，并在反應達到某一程度時(shí)，精確地自動(dòng)記錄所需要的時(shí)間，這就是酶分析自動(dòng)化中的固定濃度法;另一個(gè)發(fā)展是作成簡(jiǎn)便的酶檢測紙片。
 

　　2.動(dòng)力學(xué)法
 

　　該方式測定原理是:在一定條件下，酶促反應速度和酶濃度成正比，因此測得反應速度就需要求得酶濃度。待測的酶濃度是影響反應速度的因素，其他因素都應處于較適于酶發(fā)揮催化作用的水平，為此應選擇適宜的底物濃度、緩沖體系、溫度，并向反應系統中添加必要的輔助因子。
 

　　二、酶活性檢測實(shí)驗的測定方法：
 

　　常用的測定方法有取樣法和連續法。
 

　　取樣法是在酶反應開(kāi)始后不同的時(shí)間，從反應系統中取出一定量的反應液，并用適當方法停止其反應，再根據產(chǎn)物和底物在化學(xué)性質(zhì)上的差別進(jìn)行分析，求得單位時(shí)間內酶促反應的變化量。
 

　　連續法則是基于底物和產(chǎn)物在物理化學(xué)性質(zhì)上的不同，在反應過(guò)程中對反應系統添加酶的變性劑以終止反應。常用的連續測定法是光吸收測定法，即根據產(chǎn)物和底物在某一波長(cháng)或波段上有明顯的特征吸收差別而建立起來(lái)的連續觀(guān)測方法。幾乎所有的氧化還原酶都可用此法測定，此外如熒光法、旋光法、電化學(xué)法也是常用的連續測定方法。
 

　　對不易直接測定的反應，可使用酶偶聯(lián)分析法，即用過(guò)量、專(zhuān)一的"偶聯(lián)工具酶"，使被測反應繼續進(jìn)行到某一可直接測定的階段。