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培養基的發(fā)展史
更新時(shí)間:2012-11-22 點(diǎn)擊量:1426

 培養基的發(fā)展史

   zui初進(jìn)行細胞培養是使用天然培養基,即組織提取物和體液,例如:雞胚浸出液,血清,淋巴液等.隨著(zhù)細胞系的不斷增加,對質(zhì)量更加穩定的培養基的需求也不斷地增加,由此出現了化學(xué)成分明確的培養基,它是通過(guò)對體液成分的分析以及營(yíng)養生物化學(xué)的研究而產(chǎn)生的.Eagles Basal Medium[Eagle,1955]以用后繼的EaglesMinimal Es-sential Medium (MEM)[Eagle.1959]成為廣泛采用的合成培養基,它們可以添加各種補充成分,:牛血清,人血清,馬血清,蛋白水解物及胚胎提取物.隨著(zhù)更多連續細胞系的出現(L929,Hela),各種合成培養基成為培養絕大多數細胞的選擇.在合成培養基的發(fā)展過(guò)種有幾點(diǎn)成功之處:可替代血清;針對不同類(lèi)型的細胞制備zui適宜的培養基例如:RPMI1640適合于類(lèi)成淋巴細胞系);根據特殊的條件修正培養基例如:Leibovitz L15不需要加入CO2NaHCO3[Leibovitz,1963]).

分離和繁殖某種特殊類(lèi)型的細胞可能需要一種選擇性的無(wú)血清培養基;而為了得到產(chǎn)物所進(jìn)行的細胞培養例如將細胞作為病毒繁殖的宿主,或將細胞用于非細胞特異性的分子生物學(xué)研究則主要依賴(lài)于添加血清的Eagles MEM[Eagle1959]以及Dulbecco改良的DMEM[Dulbecco and Freerman,1959]或者是現在更多使用的RPMI1640[Moore et al.,1967].然而許多工業(yè)化生產(chǎn)技術(shù)現在使用的是無(wú)血清培養基,這樣做有利于產(chǎn)物的下游處理并可減少外來(lái)污染.在許多實(shí)驗室還流行一種折中的方法:即將一種成分復雜的培養基例如Hams F12[Ham,1965])與一種氨基酸和維生素含量較高的培養基例如:DMEM)混合使用.這種培養基不利于純化產(chǎn)物,但對于原代培養以及細胞系的繁殖卻可以產(chǎn)生多方面的促進(jìn)作用.

 

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