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培養細胞的起源
大多數人是在標準條件下用有限或連續細胞系開(kāi)展工作的.所以,考慮培養物中的細胞成分非常重要.如細胞在誘導條件下表現分化特征,要么意味著(zhù)培養的細胞是成熟的,保持其持續合成特殊蛋白質(zhì)的能力就夠了;要么意味著(zhù)培養細胞由前體細胞或干細胞組成,這些細胞有增殖能力,美工維持未分化狀態(tài),當有了合適的誘導條件,其中的一些或全部細胞會(huì )成熟并分化.有指導意義的考慮是,把培養物看成是由多能干細胞,未分化的定向前體細胞和成熟細胞組成的平衡狀態(tài),并且,這種平衡可隨環(huán)境條件變化而改變.在細胞密度較低的情況下,連續傳代可促進(jìn)細胞增殖和限制細胞分化,而高細胞密度,低血清和合適的激素條件可以促進(jìn)細胞分化,抵制細胞增殖.
培養細胞的來(lái)源可決定以后形成的培養物的細胞組成.因此,從胚胎獲得的細胞系比來(lái)源于成熟組織的細胞系包含有相對多的干細胞和前體細胞,有更強的自我更新的能力.另外,從體內不斷更新的組織(如表皮,腸上皮,造血細胞)獲得的細胞培養物仍可能含有干細胞,在適當的條件下,它們將有較長(cháng)的生命期限.但那些來(lái)源于在應激條件下才更新的組織,如成纖維細胞,肌肉,神經(jīng)膠質(zhì)的培養物,可能只含有一些生命期限明確,能進(jìn)行定向分化的前體細胞.
因此,鑒定培養的細胞時(shí),不能只局限于體內的細胞譜系(造血細胞,肝細胞,神經(jīng)膠質(zhì)細胞等),還得考慮譜系所處的生長(cháng)階段(干細胞,定向前體細胞或成熟的分化細胞).雖然,沿著(zhù)分化的進(jìn)展途徑被認為是不可逆的,但是定向(commitment)的概念目前正被人們質(zhì)疑[Kondo and Raff,2004;Le Douarin et al.,2004].某些前體細胞可以轉變成回復成干細胞狀態(tài)并且沿著(zhù)相同的或不同的譜系再分化.
在培養過(guò)程中,從腫瘤得到的細胞不遵循上述規則,例如,大鼠肝癌細胞在體外增殖,便仍能表現一些分化特征,它們越接近正常細胞的表型,細胞增殖就受到越強的抑制.雖然細胞在細胞系中的地位或許與增殖的關(guān)系并不密切,但并不是沒(méi)有關(guān)聯(lián)(例如,在高密度,低增殖速率時(shí),B1,黑色素瘤細胞產(chǎn)生的黑色素較多).到目前為止,人們還不能肯定細胞譜系之間能否發(fā)生轉變.