抗原修復應注意的問(wèn)題

操作中還應注意如下問(wèn)題：1，熱處理后應注意自然冷卻。2.熱處理時(shí)要防止切片干燥。3，應根據不同的抗體選擇合適的抗原修復方法。4，同一批抗原的檢測所用溫度和時(shí)間確保一致。5，注意形態(tài)學(xué)結構的改變（一般經(jīng)高溫修復后胞漿會(huì )明顯被破壞，對細胞核的影響較大，會(huì )出現核破裂與蘇木到淡染等現象；而經(jīng)酶水解的切片，其細胞漿破壞視消化時(shí)間長(cháng)短而異，但核破壞較輕）。6，如果在常用的緩沖液中無(wú)法實(shí)現抗原修復，或經(jīng)修復后的抗原定位發(fā)生改變，可改用一些不常用的緩沖液，或加一些螯合劑，如EDTA等可改善某些抗原的修復。

 用于免疫酶組織化學(xué)抗原修復的消化酶很多，所選酶的種類(lèi)、使用的濃度、pH、消化時(shí)間及溫度等均要視組織固定的不同，所檢測抗原的性質(zhì)與組織類(lèi)型的不同而異，應通過(guò)預實(shí)驗摸索確定。使用酶消化的原則：胰蛋白酶和蛋白酶K一般用于細胞內抗原，如Keratin,CEA與GFAP等。胃蛋白酶則主要用于細胞間質(zhì)抗原的檢測。如fibronectin,Laminin與各型膠原等。一般來(lái)說(shuō)，消化時(shí)間和組織切片固定的長(cháng)短呈正比。在用酶消化與熱修復后均不能獲得結果的前提下使用抗原修復與酶消化結合的方法，有時(shí)會(huì )取得較為滿(mǎn)意的結果。一般常用蛋白酶K和微波相結合，但應注意，無(wú)論何種性質(zhì)的抗原檢測均可能會(huì )在核內出現假陽(yáng)性反應。因此必須要做對照。