DNA甲基化實(shí)驗服務(wù)

產(chǎn)品型號：

所屬分類(lèi)：分子生物學(xué)實(shí)驗

產(chǎn)品時(shí)間：2024-08-30

簡(jiǎn)要描述：[DNA甲基化實(shí)驗服務(wù)]慢病毒,腺病毒，RNAI類(lèi)， 分子生物實(shí)驗，病理實(shí)驗，免疫學(xué)實(shí)驗，細胞實(shí)驗，動(dòng)物實(shí)驗，蛋白組學(xué)實(shí)驗，芯片類(lèi)實(shí)驗，并為廣大客戶(hù)朋友們提供課題設計指導、基金申請指導、SCI. 核心期刊等服務(wù)。

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DNA甲基化實(shí)驗服務(wù)

甲基化檢測

DNA的甲基化(Methylation) 是早發(fā)現的基因表觀(guān)修飾之--，甲基化僅修飾胞嘧啶，DNA的甲基化修飾是在DNA甲基化轉移酶的作用下使CpG雙核苷酸5端的胞嘧啶轉變?yōu)?-甲基胞嘧啶，由于CpG島主要位于基因的啟動(dòng)子和第--外顯子區域，其甲基化修飾通常抑制基因的表達，去甲基化后基因重新活化和表達。DNA甲基化修飾方式在不改變基因序列的前提下實(shí)現對基因表達的調控。

主要檢測方式

1. MSP:甲基化特異性PCR (Methylation-specific PCR)即用亞硫酸氫鹽處理基因組DNA.未甲基化的胞嘧啶被轉化為尿嘧啶，甲基化的胞嘧啶不會(huì )發(fā)生改變，設計針對甲基化序列的引物進(jìn)行PCR擴增,然后通過(guò)電泳等檢測手段檢測MSP擴增產(chǎn)物來(lái)確定位點(diǎn)是否存在甲基化。

2. BSP:亞硫酸氫鹽測序法(Bisulfite sequencing PCR)與MSP相似，用亞硫酸氫鹽將未甲基化胞嘧啶轉化為尿嘧啶，設計BSP引物進(jìn)行PCR,擴增中尿嘧啶全部轉化為胸腺嘧啶，對PCR產(chǎn)物進(jìn)行測序來(lái)判斷CpG位點(diǎn)是否甲基化。

• HRM:高分辨率溶解曲線(xiàn)法(High Resolution Melting)原理也是用亞硫酸氫鹽處理。未甲基化的胞嘧啶經(jīng)PCR擴增變成胸腺嘧啶，樣品中的GC含量發(fā)生變化從而溶解溫度發(fā)生變化,從而確定位點(diǎn)是否發(fā)生甲基化?；谙拗菩?xún)惹忻傅?/span>

測序方法:

1.靶向富集甲基化位點(diǎn)的測序方法

2. SMRT測序法

結果展示

Assay Name: miR-152-S1(8CpG)

Sample ID: Si

Note:

DNA甲基化實(shí)驗服務(wù)

實(shí)驗完成周期及交付標準

1.實(shí)驗周期: 3-5周

2.交付標準:甲基化檢測結果、實(shí)驗報告(實(shí)驗步驟、試劑、儀器等)

需確認的信息

1.目的基因及種屬

2.樣本類(lèi)型(細胞、組織、血液等)

3.目的基因片段

參考文獻

[1] Ichikawa K, Tomioka S , Suzuki Y , et al. Centromere evolution and CpG methylation during vertebrate speciation[J].Nature Communications, 2017. 8(1):1833.

[2] Yang Y , Scott S A. DNA Methylation Profling Using Long-Read Single Molecule Real-Time Bisulfite Sequencing(SMRT-BS)[J] Methods Mol Biol, 2017, 1654:125-134.

[3]Yang Y , Sebra R，Pullman B S , et al. Quantitative and multiplexed DNA methylation analysis using long-readsingle-molecule real-time bisulfite sequencing (SMRT-BS).J]. Bmc Genomics, 2015, 16(1):350.

收費標準/服務(wù)周期/提供結果:

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