免疫細胞化學(xué)ICC實(shí)驗服務(wù)

產(chǎn)品型號：

所屬分類(lèi)：病理學(xué)檢測實(shí)驗

產(chǎn)品時(shí)間：2024-08-30

簡(jiǎn)要描述：提供商: 上海研謹生物
服務(wù)名稱(chēng): 免疫細胞化學(xué)ICC實(shí)驗服務(wù)
規格: 實(shí)驗代做服務(wù)
價(jià)格：50元
上海研謹生物科技有限公司專(zhuān)業(yè)提供科研試劑產(chǎn)品，包括高*-端化學(xué)試劑、生物學(xué)試劑、免疫學(xué)檢測，ELISA試劑盒、生化試劑盒、分析標準品、對照品、標準物質(zhì)、食品安全檢測試劑、動(dòng)物疫病類(lèi)檢測產(chǎn)品、獸藥殘留檢測試劑、細胞培養服務(wù)等，應用覆蓋藥物分析

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免疫細胞化學(xué)ICC實(shí)驗服務(wù)

免疫細胞化學(xué)是將免疫學(xué)基本原理與細胞化學(xué)技術(shù)相結合所建立起來(lái)的新技術(shù),根據抗原與抗體特異性結合的特點(diǎn)，檢測細胞內某種多肽、蛋白質(zhì)及膜表面抗原和受體等大分子物質(zhì)的存在與分布。

一、 免疫細胞化學(xué)技術(shù)的概述

免疫細胞化學(xué)(immunocytochemistry, ICC)一是利用抗原與抗體特異性結合的原理，通過(guò)化學(xué)反應使標記抗體的顯色劑(熒光素、酶、屬離子同位素)顯色來(lái)確定細胞內抗原的成分(主要是多肽和蛋白質(zhì)),

對其進(jìn)行定位、定性及定量的研究，稱(chēng)為~。

(一)免疫細胞化學(xué)對抗原和抗體的要求

1)具有特異性高和親和力強的抗體是實(shí)驗成功的首要條件。

對抗體的要求: 純度高、比活性強;

2) 高度特異性抗體的獲得，取決于抗原的純度。

對抗原的要求:純度高，免疫原性強，穩定無(wú)變化。

(二)免疫細胞化學(xué)抗原(antigen, Ag)

1)抗原的概念:凡是在機體內引起體液兔疫和(或)細胞免疫反應的物質(zhì)，稱(chēng)為抗原?？乖哂袃蓚€(gè)方面的

特性:

①免疫原性:引起機體產(chǎn)生抗體和(或)致敏淋細胞的特性;

②免疫反應性:抗原能與相應的抗體及致敏淋巴細胞發(fā)生特異的結合或反應的特性。

2)根據抗原是否顯示免疫原性分為:

①*抗原:分子量較大，-般在10kDa以上,并具有較復雜的化學(xué)組成。免疫原性*-強的是蛋白質(zhì)抗原，多糖次之;脂類(lèi)和核酸必需和蛋白質(zhì)及多糖形成復合物才具有良好的免疫原性。

②半抗原:又稱(chēng)為不*抗原，分子量較小。例如:某些短肽、多糖、類(lèi)脂和藥物等。半抗原必需與載體結合，才能獲得免疫原性。

免疫細胞化學(xué)載體

通常是具有高度免疫原性的大分子物質(zhì)，具有將免疫原性傳遞給耦聯(lián)的半抗原能力。

①常用的載體有鑰孔血藍蛋白(keyhole limpet hemocyanin, KLH)、 牛血清白蛋白(bovine serumalbumin, BSA).卵白蛋白(Ovalbumin, OVA)等。

②戊二醛或碳化二亞胺作為交聯(lián)劑通過(guò)功能基團-NH2、-COOH等將半抗原結合到載體上。結合比例為5kDa結合5 ~ 25個(gè)分子的小肽。

(三)抗體(antibody, Ab)

1.抗體的概念:

①機體受到抗原刺激后，由漿細胞合成并分泌出一類(lèi)具有與抗原發(fā)生特異性結合的球蛋白，被稱(chēng)為抗體。

②抗體主要存在于血清內;

③抗體都是免疫球蛋白，但免疫球蛋白并不-定都是抗體。

④免疫球蛋白根據重鏈的結構及抗原特異性不同分為五種，既lgG、lgD、 lgE、 lgA. IgM.

2、兔疫組化實(shí)驗中常用的抗體:單克隆抗體和多克隆抗體。

①單克隆抗體:是一個(gè)B淋巴細胞克隆分泌的抗體，是應用細胞融合雜交瘤技術(shù)免疫動(dòng)物制備的。特異性強、抗體產(chǎn)量高。

②多克隆抗體:是將純化后的抗原直接免疫動(dòng)物后，從動(dòng)物血中所獲得的免疫血清，是多個(gè)B淋巴細胞克隆所產(chǎn)生的抗體混合物。

-特異性低，會(huì )產(chǎn)生抗體的交叉反應。

-多克隆抗體廣泛應用于石蠟包埋組織切片，可減少假陰性染色機會(huì )。

-抗原與抗體的結合，要求量保持一定比例， 當抗原或抗體過(guò)量時(shí)，是不能聚合成大顆粒。

3、抗體的制備一多克隆抗體的制備

①動(dòng)物的選擇

②佐劑(adjuvant)

③免疫方法

④免疫劑量

⑤抗體效價(jià)的測定

⑥放血或定期抽血

選擇什么動(dòng)物來(lái)免疫取決于:

(1)動(dòng)物的選擇

①所需抗血清的量

小鼠只能提供1.0 ~ 1.5ml的血液，而山羊能提供幾升。

②能供免疫用的抗原量小鼠50mg足夠，而山羊需要幾毫克。

③動(dòng)物的品系:免疫動(dòng)物與提供抗原的動(dòng)物之間的種系差異越大越好。

例如哺乳動(dòng)物的抗原可選擇非哺乳動(dòng)物來(lái)制備抗體。

常用的動(dòng)物有兔、羊、馬、豬等,以兔(新西蘭兔，年輕，健壯,體重在2 .5kg左右,雄性)為*-常用。

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