流式細胞分選技術(shù)實(shí)驗服務(wù)

產(chǎn)品型號：

所屬分類(lèi)：細胞生物學(xué)實(shí)驗

產(chǎn)品時(shí)間：2024-08-30

簡(jiǎn)要描述：提供商：上海研謹生物
服務(wù)名稱(chēng)：流式細胞分選技術(shù)實(shí)驗服務(wù)
規格：樣本
價(jià)格：30元
周期：2周左右

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流式細胞分選技術(shù)實(shí)驗服務(wù)

一.服務(wù)介紹

流式細胞分選技術(shù)是利用流式細胞分選儀。以高能量激光照射高速流動(dòng)狀態(tài)下被熒光色素染色的單細胞或微粒，測量其產(chǎn)生的散射光和發(fā)射熒光的強度，從而對細胞(或微粒)的物理、生理、生化、免疫、遺傳、分子生物學(xué)性狀及功能狀態(tài)等進(jìn)行定性或定量檢測的一種現代細胞分析技術(shù)，它可根據發(fā)射光的熒光強度和波長(cháng)將發(fā)光顆粒亞群分開(kāi)并可實(shí)現單克隆分選，能復雜樣本中的細胞進(jìn)行鑒定、分類(lèi).定量和分離，單次可同時(shí)對其中-種到四種特定細胞進(jìn)行超高速分選純化、高通量單克隆分選或細胞芯片制備。分選后的細胞能直接用于培養、移植、核酸提取、單細胞PCR擴增或原位雜交等，可進(jìn)一步進(jìn)行細胞基因、蛋白、功能水平的研究和不同細胞之間的差異化研究。硬件中樣本細胞丟棄的比例低于5%，保證樣本中目標細胞的高回收率。

二、實(shí)驗原理

當經(jīng)熒光染色或標記的單細胞懸液放入樣品管中，被高壓壓入流動(dòng)室內。流動(dòng)室內充滿(mǎn)鞘液,在鞘液的包裹和推動(dòng)下，細胞被排成單列，以-定速度從流動(dòng)室噴口噴出。在流動(dòng)室的噴口上配有一個(gè)超高頻的壓電晶體， 充電后振動(dòng)，使噴出的液流斷裂為均勻的液滴，待測細胞就分散在這些液滴之中。將這些液滴充以正、負不同的電荷，當液滴流經(jīng)過(guò)帶有幾千伏的偏轉板時(shí)，在高壓電場(chǎng)的作用下偏轉，落入各自的收集容器中，沒(méi)有充電的液滴落入中間的廢液容器，從而實(shí)現細胞的分離。

三、實(shí)驗流程(以分選有核紅細胞為例)

1采抗凝血10 ml。

2.密度梯度分離單個(gè)核細胞層

(1)在短中管中加入適量淋巴細胞分離液。

(2)取肝素抗凝靜脈血與等量Hank's液或RPM11640充分混勻，用滴管沿管壁緩慢疊加于分層液面上,注意保持清楚的界面。水平離心2000 rpmx20分鐘。

(3)離心后管內分為三層，上層為血漿和Hank's液， 下層主要為紅細胞和粒細胞。中層為淋巴細胞分離液，在上、中層界面處有一-以單個(gè)核細胞為主的白色云層狹窄帶，單個(gè)核細胞包括淋巴細胞和單核細胞。此外， 還含有血小板。

(4)用毛細血管插到云霧層，吸取單個(gè)核細胞。置入另-短中管中,加入5倍以上體積的Hank's液或RPMI1640, 1500rpmx10分鐘，洗滌細胞兩次。

3.免疫熒光染色

將上一步得到的單個(gè)核細胞層按1x10/1的比例加入異硫青酸(FITC)標記的CD71單克隆抗體(鼠IgM).孵育30 min后重懸于0.5 ml PBS液中進(jìn)行熒光染色。

4.FACS分選CD71陽(yáng)性細胞。

四、服務(wù)說(shuō)明

1.客戶(hù)提供血液樣本。

2.公司提供圖片和分離后的細胞。

3.實(shí)驗周期為2周左右，具體根據實(shí)驗內容而定。

五、質(zhì)量承諾

提供清晰的圖片和分選后的細胞。

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